Bacillus subtilis mejora el desarrollo de órganos digestivos, la morfología del intestino y el rendimiento productivo en pollos de engorde

La regulación en el uso de antibióticos promotores de crecimiento en la alimentación animal requiere de la búsqueda de alternativas nutricionales seguras, que mejoren la salud intestinal y el rendimiento productivo en los animales, mientras protegen la salud del consumidor. La investigación tuvo como objetivo evaluar el efecto de Bacillus subtilis sobre el desarrollo de órganos digestivos, la morfología del intestino y el rendimiento productivo, en pollos de engorde.192 pollos Cobb 500 de un día de edad fueron asignados aleatoriamente a una de tres dietas: basal libre de antibióticos (D1), basal adicionada con 10 ppm de avilamicina (D2) o basal adicionada con 50 ppm de esporas de B. subtilis (D3), durante 42 días. Los días 21 y 42 de edad, se determinó la conversión alimenticia (CA), la ganancia acumulada de peso (GAP) y se evaluó el desarrollo de los principales órganos digestivos y la histomorfología de cada segmento del intestino delgado, mediante el sacrificio de 48 aves (8 aves/dieta/día). El uso de B. subtilis incrementó significativamente la CA y la GAP. Por otra parte, B. subtilis aumentó la alométria del intestino en comparación con el uso de antibióticos, aunque no se evidenciaron diferencias significativas para el peso de órganos digestivos, entre ambos tratamientos; B. subtilis mejoró la altura de las vellosidades y disminuyó la profundidad de las criptas, significativamente. B. subtilis favorece el desempeño productivo en pollos de engorde, mejora el desarrollo de órganos digestivos y la histomorfología del intestino delgado.

Regulation in the use of growth promoters antibiotics in animal feed has led to the search for safe nutritional alternatives that improve intestinal health and growth performance in animal, while protecting consumer health. The aim was to assess the effect of Bacillus subtilis on the digestive organs development, intestinal morphology and growth performance in broilers. A total of 192 one-day old Cobb 500 chicks, were randomized and assigned to one of three diets: basal diet free of antibiotics (D1) or basal diet added with 10ppm of avilamicyn (D2) or basal diet added with 50ppm of B. subtilis's spores (D3) for 42 days. On days 21 and 42 the feed conversion ratio (FCR) and average body weight (ABW) were determined; also, eight birds per treatment were euthanized to assess the development of digestive organs and the histomorphology in the different sections of the small intestine. The use of B. subtilis significantly increased FCR and ABW. On the other hand, B. subtilis significantly small intestine length compared to antibiotic growth promoter, but there was no differences in the weight of the digestive organs between B. subtilis and antibiotic diet, in addition B. subtilis improve villus height and decreased crypt depth significantly. In conclusion, the use of B. subtilis improve growth performance, digestive organs development and small intestine histomorphology in broilers.

Aislamiento de una cepa genotipo 3 del virus de la hepatitis E obtenida de heces humanas / Cell culture isolation of hepatitis e virus genotype 3 strain obtained from human feces

ABSTRACT Hepatitis E virus (HEV) is considered one of the leading causes of acute viral hepatitis worldwide, and about 20 million infections and approximately 57 000 deaths occurred every year. However, little is known about the replicative virus cycle due to the absence of a consensus cell culture model. A549 cell line is considered susceptible to HEV genotype 3, however, both viral strain and cell culture conditions could affect the viral isolation in vitro. The objective of this work was to isolate in vitro an HEV-3 strain obtained from human feces. To this, a genotype 3 HEV strain previously identified by genetic characterization was inoculated in A549 monolayers, and incubated for two hours at 37 °C. Five days post-infection, cells were passaged (subcultured) for the first time, and serial passages were done on average every four days during 41 days. HEV replication was evaluated through RT-qPCR in each passage, and reinfection of the cell line with the viral progeny derived from A549 infected monolayers was assessed through immunofluorescence and RT-qPCR. Viral RNA was detected in each passage from infected monolayers, and the highest amount was found after 26 days (2 x 106 copies/µL). In reinfection assay, capsid antigen was detected perinuclearly and forming foci, and 1x104 copies/µL of viral RNA was detected after 96 hours post infection. This shows that HEV recovered from the cell lysate monolayers was infectious. This viral isolate offers a critical tool to study the unknown aspect of HEV infection.

RESUMEN El virus de la hepatitis E (HEV) se considera como una de las principales causas de hepatitis viral aguda en el mundo; cada año ocurren aproximadamente 20 millones de infecciones y 57 000 muertes. Debido a la ausencia de un modelo de cultivo celular consenso, se sabe poco sobre el ciclo replicativo del virus. La línea celular A549 se considera susceptible al genotipo 3 de HEV, pero tanto la cepa viral como las condiciones del cultivo celular podrían afectar el aislamiento viral in vitro. Por tanto nos propusimos aislar in vitro una cepa genotipo 3 del HEV. Para ello, se inocularon células A549 con una cepa HEV-3 identificada previamente por caracterización genética, y se incubó durante dos horas a 37 °C. Cinco días después de la infección, las células se pasaron (subcultivaron) por primera vez, y se realizaron pases seriados cada cuatro días en promedio, durante 41 días. En cada pase se evalúo la replicación del HEV mediante RT-qPCR. La reinfección de la línea celular con progenie viral derivada de monocapas de A549 infectadas se evaluó mediante inmunofluorescencia y RT-qPCR. Se detectó ARN viral en cada pase a partir de monocapas, y el pico máximo se alcanzó a los 26 días post infección (2 x 106 copias/µL). En el ensayo de reinfección, se detectó antígeno de cápside perinuclearmente y formando focos, y se detectaron 1 x 104 copias/µL de RNA viral a las 96 horas post infección. El HEV recuperado de lisado de monocapas fue infeccioso. Este aislado viral ofrece una herramienta importante para estudiar aspectos desconocidos de la infección por HEV.

Efecto del aceite esencial de orégano (Lippia origanoides) sobre metabolitos sanguíneos en pollos de engorde / Effect of oregano essential oil (Lippia origanoides) on blood metabolites in broiler chickens / Efeito do óleo essencial de orégano (Lippia origanoides) sobre metabolitos sanguíneos em frangos de corte

Resumen Objetivo: evaluar parámetros sanguíneos en pollos de engorde de la línea genética Cobb500, luego de la administración de aceite esencial de orégano (Lippia origanoides) (AEO). Materiales y métodos: se utilizaron 200 pollos de línea genética Cobb 500 y se realizaron mediciones los días 14, 28 y 42. Los animales fueron aleatorizados a una de dos dietas: dieta comercial con antibiótico y sin este. A esta última se adicionaron diferentes concentraciones de AEO (75 ppm, 100 ppm o 200 ppm AEO). Se realizó un diseño estadístico de bloques al azar en un arreglo de parcelas dividas. Resultados: los pollos del grupo D5 (200 ppm) presentaron mayores valores en glucosa, fosfatasa y fósforo que los pollos alimentados con antibiótico (D2) a lo largo del experimento. Conclusión: la adición de 200 ppm de AEO en el alimento de pollos de engorde de la línea genética Cobb 500 induce una mejora en metabolitos sanguíneos. Este trabajo permitió evaluar las variables metabólicas de pollos que consumieron AEO.

Abstract Objective: To evaluate blood parameters in broiler chickens of the Cobb 500 genetic line, after the administration of oregano essential oil (Lippia origanoides) (OEO). Materials and methods: 200 chickens of the Cobb 500 genetic line were used, and measurements were taken on days 14, 28, and 42. The animals were randomly assigned to one of two diets: commercial diet with and without antibiotic supplementation. To the antibiotic-free diet different concentrations of OEO were added (75 ppm, 100 ppm, or 200 ppm). A statistical randomized block design was used in an array of divided plots. Results: Chickens from group D5 (200 ppm of OEO) had higher values in glucose, phosphatase, and phosphorus than chickens fed with antibiotic supplementation (D2) throughout the experiment. Conclusion: The addition of 200 ppm of OEO in the food of broiler chickens of the Cobb 500 genetic line induces an improvement in blood metabolites. This work allowed evaluating metabolic variables of chickens that consumed OEO.

Resumo Objetivo: avaliar parâmetros sanguíneos em frangos de corte da linha genética Cobb500, após administração de azeite essencial de orégano (Lippia origanoides) (AEO). Materiais e métodos: Foram utilizados 200 frangos de linha genética Cobb 500 e foram realizadas medições nos dias 14, 28 e 42. Os animais foram submetidos aleatoriamente a uma de duas dietas: dieta comercial com antibiótico e sem este. A esta última foram adicionadas diferentes concentrações de AEO (75 ppm, 100 ppm ou 200 ppm AEO). Se realizou um desenho estatístico de blocos aleatórios em uma matriz de parcelas dividas. Resultados: os frangos do grupo D5 (200 ppm) apresentaram maiores valores em glicose, fosfatase e fósforo que os frangos alimentados com antibiótico (D2) ao longo do experimento. Conclusão: a adição de 200 ppm de AEO no alimento de frangos de corte da linha genética Cobb 500 induz a uma melhora em metabolitos sanguíneos. Este trabalho permitiu avaliar as variáveis metabólicas de frangos que consumiram AEO.

Efecto de la inclusión de aceite esencial de orégano (Lippia origanoides) sobre perfil lipídico en carne de pollos de engorde / Effect of inclusion of essential oil of oregano (Lippia origanoides) on lipid profile in broiler meat

Antecedentes: la trasmisión de trazas de antibióticos en la carne, ha llevado a la prohibición de la utilización de alimentos con antibióticos promotores de crecimiento en las diferentes especies productivas para consumo humano. Por lo anterior, se hace necesario buscar nuevas alternativas que puedan remplazar la función que éstos desempeñan durante el proceso productivo. Objetivo: evaluar el perfil lipídico de pechugas en pollos de engorde de la línea genética Cobb500, luego de la administración Aceite Esencial de Orégano (Lippia origanoides) (AEO). Métodos: se utilizaron 200 pollos de línea genética Cobb500 y se realizó el muestreo de pechuga para el perfil lipídico, sólo el día 42. Los animales fueron aleatorizados a una de cinco dietas: dieta comercial con y sin antibiótico, dieta comercial sin antibiótico adicionada con diferentes niveles de AEO (75ppm, 100ppm o 200ppm AEO). Los animales fueron sacrificados a los 42 días de edad, y se realizó la toma de muestras de pechuga y contramuslo para determinar el perfil de ácidos grasos por cromatografía de gases. Se realizó un diseño estadístico de bloques al azar cada tratamiento tuvo un total de cuatro repeticiones; el análisis estadístico se realizó según el procedimiento GLM (Modelos Lineales Generales) del SAS. Resultados: el perfil lipídico en pechugas mostró resultados más sobresalientes en la dieta con mayor adición de AEO (0.72, C14:0; 29.1, C16:0; 6.01, C18:0). Conclusión: La adición de 200ppm de AEO (Lippia origanoides) en el alimento de pollos de engorde de la línea genética Cobb500 induce una mejora en la composición de ácidos grasos de su carne.

Background: the transmission of traces of antibiotics in meat, has led to the prohibition of the use of food with antibiotics growth promoters in the different productive species for human consumption. Therefore, it is necessary to look for new alternatives that can replace the function they perform during the production process. Objectives: to evaluate the lipid profile of breasts in broilers of the Cobb500 genetic line, after the administration of Essential Oil of Oregano (Lippia origanoides) (AEO). Methods: 200 chickens of Cobb500 genetic line were used. The animals were randomized to one of five diets: commercial diet with and without the addition of antibiotic, commercial diet without antibiotic added with three different levels of AEO (75ppm, 100ppm or 200ppm AEO). The animals were sacrificed at 42 days of age, and breast and thigh samples were taken to determine the fatty acid profile by gas chromatography. A statistical block design was performed randomly, each treatment had a total of four repetitions; the statistical analysis was performed according to the GLM (General Linear Models) procedure of the SAS. Results: the lipid profile in breasts showed more outstanding results in the diet with greater addition of AEO (0.72, C14: 0, 29.1, C16: 0, 6.01, C18: 0). Conclusions: the addition of 200ppm of AEO in the broiler feed of the Cobb500 genetic line induces an improvement in meat quality in the fatty acid composition of the broiler carcass.

COEFICIENTES DE DIGESTIBILIDAD APARENTE DE Thitonia diversifolia Y Cratylia argentea EN CACHAMA BLANCA Y EFECTOS SOBRE LAS VELLOSIDADES INTESTINALES / APPARENT DIGESTIBILITY COEFFICIENTS OF Thitonia diversifolia AND Cratylia argentea BY CACHAMA BLANCA AND ITS EFFECTS ON INTESTINAL VILLI

En atención a identificar nuevas materias primas fuentes de proteína que no compitan con la alimentación humana, se determinaron los coeficientes de digestibilidad aparente de la proteína (CDA-P), materia seca (CDA-MS) y energía (CDA-E), de botón de oro Tithonia diversifolia y cratylia Cratylia argentea, en Piaractus brachypomus y los efectos sobre las vellosidades intestinales. Para estimar estos coeficientes, se utilizó el método indirecto con marcador, colectando heces. Se utilizaron 120 cachamas (peso promedio 210g), alimentadas con dieta referencia semipurificada (DRS) 69,5%, 0,5% de marcador inerte y la materia prima en 30% de inclusión. Las heces, se recolectaron 10h después de haber suministrado el alimento en los tanques, cada hora, durante 12h. Para medir las vellosidades del intestino anterior, se tomaron muestras en tres tiempos de consumo de las dietas: 0 (Día 0), 5 (Día 5) y 10 días (Día 10). Los CDA-P fueron 69,42%, para botón de oro y 44,84%, para cratylia, con diferencia estadística. En cuanto a CDA-E, botón de oro fue 67,37% superior y, estadísticamente, diferente a cratylia 34,27%. Las materias primas causaron denudación en las vellosidades durante los primeros 5 días de consumo; sin embargo, a los 10 días, las vellosidades comenzaron a recuperar su altura, lo que demostró la capacidad de adaptación de la cachama blanca a dietas, con materias primas evaluadas.

In order to identify new sources of raw protein materials and not compete with human food, was the apparent digestibility coefficients of protein (CDA-P), dry matter (CDA- MS) and energy (CDA-E) of mexican sunflower (BO) Tithonia diversifolia and Cratylia (CR) Cratylia argentea, for cachama blanca Piaractus brachypomus and their effects on intestinal villi were determined. To estimate these coefficients, the indirect method with marker, feces collecting were employed. A hundred and twenty white cachamas (average weight 210g), fed on a diet reference semipurified (DRS) 69.5%, 0.5% inert trace marker ingredient and raw material were evaluated at a level of 30% inclusion. Feces were collected after 10 hours of food supply each hour during 12 hours. To measure the villi, intestine samples were taken at three times of diet consumption: 0, 5 and 10 days. The CDA-P were: 69.42% for Mexican sunflower and 44.84% for cratylia, being statistically differet. As for CDA E, Mexican sunflower 67.37% were higher and statistically different than cratylia 34.27%. Although digestibility values obtained for these raw materials were lower than those reported for raw materials most commonly used in fish feed, the Mexican sunflower approaches to soybean cake. Raw materials caused denudation in the villi during the first few days, however after 10 days the villi started to recuperate its high, showing an adaption of P. brachypomus to the evaluated ingredients.

Adding probiotic strains modulates intestinal mucin secretion in growing pigs ileum / La adición de cepas probióticas modula la secreción de mucinas intestinales en íleon de cerdos en crecimiento / Adição de estirpes probióticas modula a secreção de mucinas intestinais em íleo de suínos em crescimento

Mucin represents the most important barrier of the gastrointestinal tract against pathogens that generate enteric diseases. Therefore, arises the need to implement nutritional strategies that promote intestinal mucin production and health, and in turn, the decline in the use of antibiotics to mitigate the diseases of this stage comes. Therefore, the effect of adding different probiotic strains (Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus and Enterococcus faecium) on the production of Sulfated Acid Mucins (MAS), Non- Sulfated Acid Mucins (MANS) and Neutral Mucins (MN) in newly weaned piglets was assessed. 35 days 1 piglets (21 days old), 15 and 30 weaned humane euthanasia was performed, and were extracted the ileum to evaluate the production of intestinal mucins different. They were offered the animals a commercial diet with added antibiotics and one without addition of antibiotic; and different probiotics are added in the drinking water. The experimental design was randomized block in split plot arrangement. A significant increase (P <0.01) in the production of MAS, MN MANS and on day 30 after weaning in those animals fed E. faecium, compared to those who ate the diet with added antibiotics was observed. E. faecium in the diet of weaned piglets promotes the production and secretion of mucin, which could be reflected in the intestinal health of themselves and their time, clinical, health and productive parameters of the animals.

La mucina representa la barrera de protección más importante del tracto gastrointestinal contra los patógenos que generan enfermedades entéricas. Debido a lo anterior, surge la necesidad de implementar estrategias nutricionales que mejoren la producción de mucinas y salud intestinal, y a su vez, la disminución en el uso de antibióticos para mitigar las enfermedades propias de la etapa de levante. Por tanto, se evaluó el efecto de la adición de diferentes cepas probióticas (Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus o Enterococcus faecium) sobre la producción de Mucinas Ácidas Sulfatadas (MAS), Mucinas Ácidas no Sulfatadas (MANS) y Mucinas Neutras (MN) en lechones recién destetos. Se realizó eutanasia humanitaria a 35 lechones los días 1 (21 días de edad), 15 y 30 posdetete, y se les extrajo la porción del íleon para evaluar la producción de las diferentes mucinas intestinales. Se les suministró a los animales una dieta comercial con adición de antibióticos y otra sin adición de antibiótico a la cual se le adicionaron los diferentes probióticos en el agua de bebida. El diseño estadístico utilizado fue de bloques al azar en un arreglo de parcelas divididas. Se observó un aumento significativo (P<0,01) en la producción de MAS, MANS y MN en el día 30 posdestete en aquellos animales que consumieron E. faecium, frente a aquellos que consumieron la dieta con adición de antibiótico. E. faecium en la dieta de lechones destetos promueve la producción y secreción de mucinas, que puede verse reflejado en la salud intestinal de los mismos y a su vez, en los parámetros clínicos, sanitarios y productivos de los animales.

A mucina representa a barreira de proteção mais importante do trato gastrointestinal em contra dos patógenos geradores de doenças entéricas. Portanto, surge a necesidade de implementar estratégias nutricionais para promover a produção de mucinas e saúde intestinal e, por sua vez, a disminuição no uso de antibióticos para mitigar as doenças. Portanto, foi evaluado o efeito da adição de diferentes cepas probióticas (Lactobacillus casei, Lactobacillus acidophilus e Enterococcus faecium) sobre a produção de Mucina Ácida Sulfatada (MAS), Mucinas Ácido não Sulfatado (MANS) e Mucinas neutras (MN) em leitões recém-desmamados. Foi realizada a eutanásia humanitária a 35 leitões nos dias 1, 15 e 30 após o desmame, e extraiu-se o íleo para avaliar a produção de diferentes mucinas intestinais. Eles fornecem uma dieta comercial de animais com adição de antibióticos e sem adição de um antibiótico; e diferentes probióticos são adicionados na água de beber. O Delineamento enteramente casualizado em parcelas subdivididas. Foi observado um aumento significativo (P<0,01) na produção de MAS, MANS e MN no dia 30 após o desmame nesses animais alimentados com E. faecium, em comparação com aqueles que comiam a dieta adicionada com antibiótico. E. faecium na dieta de leitões desmamados promove a produção e secreção de mucina, o que poderia ser refletido na saúde intestinal e, por sua vez, nos parâmetros clínicos, de saúde e produtivos dos animais.

Inclusion of probiotic strains improves immune parameters in broilers / La inclusión de cepas probióticas mejora los parámetros inmunológicos en pollos de engorde / A inclusão de estirpes probióticas melhoram os parâmetros imunológicos em frangos de corte

Broilers face pathogenic agents daily, which could trigger intestinal problems and cause the immune system to not respond effectively. Probiotics improve natural defense mechanisms through the modulation of intestinal microbiota (bactericide effect), which play a critical role in supporting the host's health. The objective of this study was to evaluate the inclusion of different probiotic strains in feeding broilers and its effect on the immune system. 125 one-day-old male chicks (Cobb) who underwent allometric analysis of lymphoid organs (bursa, thymus, spleen), intestinal pH and antibody titer against gumboro was performed on days 7, 14, 21, 28, 35 and 42 (D1 and D2 respectively). Birds were fed two diets: basal diet with and without the addition of antibiotics. Probiotics (L. casei, L. acidophilus or E. faecium) were supplied in the drinking water (10(8) UFC/ml) of animals fed the basal diet without antibiotics (D2), representing the others experimental diets (D1, D2 and D3 respectively). The statistical design was a randomized block split-plot arrangement. The inclusion of probiotics, specifically E. faecium, helped maintain a lower intestinal pH, the greater weight of lymphoid organs and a greater degree of vaccine antibodies against Gumboro, promoting animal health. Therefore, E. faecium, can be used in the feeding of broilers throughout the production cycle as growth promoter.

Las aves se enfrentan diariamente a agentes patógenos que podrían desencadenar problemas a nivel intestinal y ocasionar que el sistema inmune no responda de manera efectiva. Los probióticos, pueden mejorar los mecanismos de defensa naturales a través de la modulación de la microbiota intestinal (efecto bactericida), la cual desempeña un papel crítico en el mantenimiento de la salud del hospedero. El objetivo de este trabajo fue evaluar la inclusión de diferentes cepas probióticas en la alimentación de pollos de engorde y su efecto sobre el sistema inmune. Se utilizaron 125 pollos machos (Cobb) de un día de edad a los cuales se les realizó análisis alométrico de órganos linfoides (bursa, timo y bazo), pH intestinal y título de anticuerpos contra gumboro los días: 14, 28, y 42. Las aves fueron alimentadas con dos dietas: dieta basal con y sin la adición de antibiótico (D1 y D2 respectivamente). Los diferentes probióticos (L. casei, L. acidophilus o E. faecium) se suministraron en el agua de bebida (10(8) UFC/ml) de los animales que consumieron la dieta basal sin antibiótico (D2), representando las demás dietas experimentales (D3, D4 y D5 respectivamente). El diseño estadístico utilizado fue de bloques al azar en arreglo de parcelas divididas. La inclusión de probióticos, específicamente E. faecium, ayudaron a mantener un pH intestinal más bajo, y mayor peso de los órganos linfoides y títulos de anticuerpos post-vacunales contra gumboro, favoreciendo la salud del animal. Por lo anterior, E. faecium, puede ser utilizado en la alimentación de aves durante todo el ciclo productivo como promotor de crecimiento.

Os frangos enfrentam-se diariamente a agentes patógenos que poderiam desencadear problemas a nível intestinal e ocasionar que o sistema imunológico não responda efetivamente. Os probióticos podem melhorar os mecanismos naturais de defesas pela modulação da microbiota intestinal (efeito bactericida), a qual desempenha um papel critico na mantença da saúde do hospedeiro. O objetivo deste trabalho foi avaliar a inclusão de deferentes estirpes probióticas na alimentação de frangos de corte e seu efeito sobre o sistema imunológico. Foram utilizados 125 frangos machos (Cobb) de um dia de idade aos quais se foi realizado um analise allometric de órgãos linfoides (Bursa, timo y baço), pH intestinal e titulo de anticorpos contra o gumboro nos dias: 14, 28, y 42. Os frangos foram alimentados com duas dietas: dieta basal com e sem a adição de antibióticos (D1 e D2 respectivamente). Os diferentes probióticos (L. casei, L. acidophilus ó E. faecium) foram fornecidos na água de bebida (10(8) UFC/ml) dos animais alimentados com a dieta basal sem antibióticos (D2), representando assim as outras dietas experimentais (D3, D4 e D5 respectivamente). O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados em esquema de parcelas subdivididas. A inclusão de probióticos, especialmente E. faecium, ajudaram a manter o pH intestinal inferior, e um maior peso dos órgãos linfoides e os títulos dos anticorpos pós a vacinação contra o gumboro, promovendo a saúde dos animais. Portanto, E. faecium, pode ser utilizado na alimentação dos frangos durante todo o ciclo de produção como um promotor de crescimento.

Determinación de anticuerpos totales (IgG/IgM) y específicos (IgM) para el virus de la hepatitis E y detección molecular del virus en heces de humanos con o sin exposición ocupacional a porcinos en 10 municipios de Antioquia / Determination of total (IgG/IgM) and specific (IgM) antibodies to Hepatitis E Virus and molecular detection of the virus in feces of humans with or without occupational exposure to pigs in 10 municipalities of Antioquia, Colombia / Determinação de anticorpos totais (IgG/IgM) e específicos (IgM) para o vírus da hepatite E e detecção molecular do vírus em fezes de humanos com ou sem exposição ocupacional a porcinos em 10 municípios de Antioquia

En 10 municipios de Antioquia se determinó la seropositividad para anticuerpos totales (IgG/ IgM) y específicos (IgM) para el virus de la hepatitis E (VHE), y se buscó identificar el RNA del virus en heces de personas positivas para IgM. Se evaluaron dos grupos: uno de individuos expuestos a cerdos y otro sin dicha exposición, este último dividido en dos subgrupos (convivientes de expuestos y población general). La frecuencia de anticuerpos totales en los expuestos fue del 15,7% y la de IgM, del 2,5% (p < 0,001). En el grupo sin exposición ocupacional pero convivientes de expuestos, los anticuerpos totales se hallaron en el 5,9% y no se detectó IgM. En el subgrupo de población general la seropositividad fue del 7,2% para IgG/IgM y del 0,81% para IgM (p < 0,001). En ninguna de las muestras de heces de individuos positivos para IgM se halló el RNA del VHE. Los resultados muestran que los individuos expuestos ocupacionalmente a cerdos tienen mayor riesgo (RP: 2,42) de presentar anticuerpos anti-VHE que aquellos sin dicha exposición (CI95%: 1,66-3,53) (p < 0,001). También indican que en Antioquia el VHE circula en personas con y sin exposición a cerdos. Se requieren más estudios sobre el VHE en Colombia.

Em 10 municípios de Antioquia se determinou a seropositividade para anticorpos totais (IgG/IgM) e específicos (IgM) para o vírus da hepatite E (VHE), e se procurou identificar o RNA do vírus em fezes de pessoas positivas para IgM. Avaliaram-se dois grupos: um de indivíduos expostos a porcos e outro sem dita exposição, este último dividido em dois subgrupos (conviventes de expostos e população geral). A frequência de anticorpos totais nos expostos foi de 15,7% e a de IgM, do 2,5% (p < 0,001). No grupo sem exposição ocupacional, mas conviventes de expostos, os anticorpos totais se acharam em 5,9% e não se detectou IgM. No subgrupo de população geral a seropositividade foi de 7,2% para IgG/IgM e de 0,81% para IgM (p < 0,001). Em nenhuma das mostras de fezes de indivíduos positivos para IgM se achou o RNA do VHE. Os resultados mostram que os indivíduos expostos ocupacionalmente a porcos têm maior risco (RP: 2,42) de apresentar anticorpos anti-VHE que aqueles sem dita exposição (CI95%: 1,66-3,53) (p < 0,001). Também indicam que em Antioquia o VHE circula em pessoas com e sem exposição a porcos. Requerem-se mais estudos sobre o VHE na Colômbia.

Escherichia coli lipopolysaccharides decrease molecular expression and activity of disaccharidases and aminopeptidases in weaned pigs / Los lipopolisacáridos de Escherichia coli disminuyen la expresión y la actividad de disacaridasas y aminopeptidasas en lechones destetados / Lipopolissacarídeo de Escherichia coli diminui a expressão ea atividade de dissacaridases e aminopeptidase em leitões desmamados

Background:Escherichia coli populations in the gut increase after weaning, releasing cell wall lipopolysaccharides (LPS), which are potent pro-inflammatory substances.Objective: this study evaluated LPS intake effects on protein expression and activity of intestinal disaccharidases and aminopetidases. Methods: sixty-four pigs (weaning age: 21 d) were fed a basal diet with added LPS (0.0, 0.3, 0.5, and 1.0 µg LPS/mg feed) during 10 days post-weaning. Pigs were slaughtered on days 1, 5, 7, and 10 post-weaning to assess small intestine molecular expression and enzyme activity. A randomized block design in a 4x4 factorial arrangement was used. Results:intestinal enzyme expression and activity was lower in pigs fed the highest LPS level (p<0.01). Enzyme values were lowest at day 10 (p<0.01). The highest gene expression and enzyme activity was observed in duodenum (p<0.01). Conclusion: data from this study suggest that LPS from E. coli decreases intestinal enzyme expression and activity.

Antecedentes: la población de Escherichia coli incrementa luego del destete, liberando desde su pared celular lipopolisacáridos (LPS) los cuales son potentes productos pro-inflamatorios.Objetivo: este estudio evaluó el consumo de diferentes niveles de LPS sobre la expresión y actividad de disacaridasas y aminopeptidasas intestinales. Métodos:sesenta y cuatro cerdos (destetados a los 21 de edad) fueron alimentados (durante los 10 días posteriores al destete) con una dieta basal a la cual se le adicionó diferentes niveles de LPS (0,0, 0,3, 0,5 y 1,0 µg LPS/mg alimento). Los cerdos fueron sacrificados los días 1, 5, 7 y 10 posdestete para determinar la expresión molecular y actividad enzimática en el intestino delgado. Se utilizó un diseño de bloques al azar en un arreglo factorial 4x4. Resultados: la expresión y actividad enzimática intestinal fue menor en los cerdos alimentados con el nivel máximo de LPS (p<0,01). En el día 10 posdestete se observaron las menores expresiones y actividades enzimáticas (p<0,01), mientras que en el duodeno se observaron los mayores valores (p<0,01). Conclusión: la información obtenida en este estudio sugiere que el LPS de E. coli disminuye la expresión y actividad enzimática intestinal.

Antecedentes: a população de Escherichia coli se aumenta após do desmame, que libera desde sua parede celular lipopolissacarídeo (LPS), que são potentes productos pró-inflamatórios. Objetivo: este estudo avaliou o consumo de LPS sobre a expressão e atividade de dissacaridases e as aminopeptidases intestinais. Métodos: sessenta e quatro porcos (desmamados aos 21 días de edade) foram alimentados (durante 10 días após desmame) com uma dieta de base ao qual foi adicionada diferentes níveis de LPS (0,0, 0,3, 0,5 y 1,0 µg LPS/mg alimento). Os leitões foram abatidos os días 1, 5, 7 e 10 após desmame para determinar a expressão molecular e a atividade enzimática no intestino delgado. Foi usado delineamento em blocos casualizados num fatorial 4x4. Resultados: expressão intestinal e atividade enzimática foi menor nos animais que receberam o maior nível de LPS (p<0,01). No día 10 após desmame foram observadas as menores expressões e atividades enzimáticas (p<0,01), en quanto que no duodeno foram observados os valores mais elevados (p<0,01). Conclusão: as informações obtidas neste estudo sugerem que o LPS de E. coli diminui a expressão e atividade enzimática intestinal.

Serological and molecular detection of Hepatitis E virus in pig farms of Antioquia / Detección serológica y molecular del virus de la Hepatitis E en cerdos de granjas antioqueñas / Detecção serológica e molecular do vírus da hepatite E em suínos no departamento de Antioquia, Colômbia

Hepatitis E virus (HEV) is the viral agent that produces most cases of acute hepatitis worldwide. Four genotypes and 24 subtypes of HEV have been identified. Presence of viral strains in pigs suggests this species is a reservoir for HEV. A case of Hepatitis E in humans has been reported in Antioquia, the largest pig producer and pork consumer province in Colombia. This study investigated the presence of HEV in pigs from several swine farms in Antioquia by looking for anti-HEV antibodies and viral RNA in pig feces. Serological tests were performed for detecting IgG and IgM anti-HEV. Molecular assays (RT-PCR) were also used for detecting the ORF-1 marker of HEV viral genome. These procedures were performed on 210 animals from 30 pig farms. Presence of antibodies and molecular analysis were organized by frequencies and analyzed using the R software (version 2.15.2). 100% of the samples were positive for IgG antibodies, while 57% of the samples were positive for IgM antibodies. According to the molecular analysis, 26% of pig feces had genetic material from HEV. This study demonstrates exposure and circulation of HEV in pig farms of Antioquia.

La Hepatitis E es una enfermedad producida por el Virus de Hepatitis E (HEV), considerado el agente vírico con mayor producción de hepatitis agudas alrededor del mundo. Se han determinado 4 genotipos y 24 subtipos de HEV. La presencia de cepas virales tanto en humanos como en otras especies, ha sugerido que existen reservorios animales para HEV, entre los cuales el cerdo juega un papel importante. En Antioquia se ha reportado un caso de Hepatitis E en humanos. Teniendo en cuenta que este departamento es el principal productor y consumidor de cerdos en Colombia, se investigó la presencia de este virus en los cerdos de diferentes granjas porcícolas, con el fin de determinar anticuerpos anti-HEV y RNA viral en heces porcinas. Para lograr esto, se realizaron pruebas serológicas para la detección de anticuerpos IgG e IgM anti-HEV, y pruebas moleculares (RT-PCR) para la detección del marcador ORF-1 del genoma viral de HEV. Estos procedimientos se realizaron en 210 animales de 30 granjas porcícolas de Antioquia. La presencia de anticuerpos y análisis moleculares en los cerdos, se determinaron por frecuencias y se analizaron mediante el software R versión 2.15.2. El 100% de las muestras fueron positivas para anticuerpos IgG; mientras que para anticuerpos IgM, los positivos representaron el 57% de las muestras evaluadas. El análisis molecular determinó que el 26% de los cerdos presentó material genético de HEV en sus heces. Esta información demuestra la exposición y la circulación de HEV en cerdos de las granjas evaluadas en municipios de Antioquia.

A hepatite E é uma doença produzida pelo vírus da hepatite E (HEV), considerado o agente virulento com maior produção de hepatites agudas ao redor do mundo. Tem se determinado quatro genótipos e 24 subtipos de HEV. A presença de cepas virais tanto em humanos quanto em outras espécies, tem sugerido que existem reservatórios animais para HEV, entre os quais o suíno tem grande importância. Em Antioquia tem se reportado um caso de hepatite E em humanos. Tendo de presente que este departamento é o principal produtor e consumidor de suínos na Colômbia, pesquisou-se a presença deste vírus em suínos de diferentes granjas suínas, com o fim de determinar anticorpos anti-HEV e RNA viral em fezes porcinas. Para lograr isto, realizaram-se testes serológicos para a detecção de anticorpos IgG e IgM anti-HEV e testes moleculares (RT-PCR) para a detecção do marcador ORF-1 do genoma viral de HEV. Estes procedimentos realizaram-se em 210 animais de 30 granjas suínas em Antioquia. A presença de anticorpos e as análises moleculares nos suínos, determinaram-se por frequências e se analisaram mediante o software R Versão 2.15.2. O 100% das amostras foram positivas para anticorpos IgG; enquanto que para anticorpos IgM os positivos representaram o 57% das amostras avaliadas. O analise molecular determinou que o 26% dos suínos apresentou material genético de HEV em suas fezes. Esta informação demonstra a exposição e circulação de HEV em suínos das granjas avaliadas em municípios de Antioquia, Colômbia.

Expresión molecular de la vilina en yeyuno de lechones posdestete que consumieron LPS de E. coli / Molecular expression of villin in jejunum of weaned pigs after oral intake of LPS from E. coli / Expressão molecular da Vilina no jejuno de leitões recém desmamados que consumiram LPS de E. coli

Resumen Con el objetivo de evaluar el efecto la adición de lipopolisacárido LPS de E. coli sobre la expresión molecular de vilina en yeyuno de lechones posdestete, se sacrificaron 52 lechones escalonadamente los días 1 (21 días de edad, día del destete), 5, 7 y 10 posdestete, y se les extrajo completamente el yeyuno para la evaluación de la expresión molecular de vilina. Para inducir la inflamación intestinal los animales fueron alimentados con una dieta basal, adicionada con cuatro niveles de LPS (0, 0.3, 0.5 y 1.0 µg/mg de alimento). El diseño estadístico utilizado fue de bloques al azar en arreglo factorial de 4X4. Se observó una disminución (P<0.01) en la expresión molecular de vilina en los animales que consumieron la dieta con mayor nivel de inclusión de LPS. El LPS de E. coli disminuye la expresión de vilina, lo que está directamente implicado en los cambios morfológicos intestinales, específicamente en la disminución de la altura y el aumento del el ancho de las vellosidades. Este efecto probablemente contribuye a la disminución de la absorción intestinal de nutrientes y a la presentación del síndrome de diarrea posdestete.

Abstract This experiment evaluated the effect of oral intake of E. coli lipopolysaccharide (LPS) by weaned pigs on the molecular expression of villin in jejunum. A total of 52 pigs were used. Pigs were sequentially slaughtered to take the jejunum on days 1 (weaning day, at 21 days of age), 5, 7, and 10 post-weaning. Intestinal inflammation was induced by feeding the animals a basal diet supplemented with one of four LPS levels (0, 0.3, 0.5, and 1.0 µg/mg feed). A completely randomized block design was used in 4X4 factorial arrangement. Animals fed the diet with the highest LPS level of inclusion showed a decreased (P<0.01) molecular expression of villin. In conclusión, LPS from E. coli decreases villin expression, which is directly implicated in intestinal morphology changes, specifically decreasing height and increasing the width of the villi. This effect probably contributes to decreased intestinal absorption of nutrients and also to ocurrence of postweaning diarrhea syndrome.

Resumo Teve-se como objetivo avaliar a adição de lipopolissacarídeos LPS de E. coli sobre a expressão molecular da Vilina no jejuno de leitões pós-desmame. Para isto, abateram-se 52 leitões nos dias 1, 5, 7 e 10 após desmame (desmame aos 21 dias de idade, este é o dia zero) e extraiu-se lhes completamente o jejuno para fazer a avaliação da expressão molecular da Vilina. Para induzir a inflamação intestinal os animais foram alimentados com uma dieta basal, adicionada com quatro níveis de LPS (0, 0.3, 0.5 y 1.0 µg/mg de alimento). O delineamento estatístico utilizado foi de blocos ao acaso com desenho fatorial de 4x4. Observou-se uma diminuição (P<0.01) na expressão molecular da Vilina nos animais que consumiram a dieta com maior nível de inclusão de LPS. O LPS da E. coli diminuiu a expressão da Vilina, fato este que explica as mudanças morfológicas intestinais, especificamente na diminuição da altura e o aumento da largura das vilosidades. Este efeito provavelmente contribuiu com a diminuição da absorção intestinal de nutrientes e à apresentação da síndrome de diarreia pós-desmame.